↓ 組織を取り出す
↓ 適当な大きさに細切
↓ cold 固定液にて固定、4℃、30min
固定液： 2% paraformaldehyde
0. 2% glutaraldehyde
0.02% NP-40
mix in PBS
↓ cold PBSにて洗浄、5minを3回以上
↓ 10% sucrose in PBS、4℃、2hr
（臓器が沈むようになるのが目安）
↓ 20% sucrose in PBS、4℃、2hr
↓ 30% sucrose in PBS、4℃、2hr
↓ O.C.T. compoundに包埋、急速凍結（薄切まで-20℃保存）
（水、空気が混入しないように）
↓ 薄切（10～15um）
クライオスタット（常にPower ONにて冷やされている）
↓ ランプ点灯
↓ 15min、サンプルを-20℃にて静置
↓ サンプルをO.C.T. compoundを用いてアダプタに取り付ける
↓ 刃をセット（刃は切れなくなったらすぐ取り替える）
↓ サンプルの角度を刃に対して水平にしてねじで固定
↓ サンプルのカバーを取り除く
↓ 面出しを行う
↓ 薄切
↓ 切片はスライドグラス（コーティング無し）にのせて、
室温にて15min以上乾燥させる
↓ 片付け
↓ PBSにて包埋剤を洗い流す
↓ 発色反応、37℃（室温）で1～3hr、または4℃にてO/N
↓ 分別（方法により異なる）
・ 保存液
・ 流水（2hr）
・ PBS など
↓ 対比染色（核染など）
↓ 封入（水溶性封入剤、オイキットなど）
↓ 観察