フローサイトメトリー（橋本 泰美）
原理
レーザー光を用いて光散乱や蛍光測定を行うことにより、フローセル中を通過する単一細胞の大きさ、DNA量、細胞表面抗原の分布状態、細胞内酵素活性、ｐHの相違などの性状を計測する方法のこと。細胞、核、染色体など単離した粒状のもの、特に細胞のサブセットを分種計測するのに最適である。
使用機器
FACS caliber
使用方法
↓ 電源を入れる （装置の電源を入れた15秒後にMacを立ち上げる）
・ 本体の引き出しをあけて圧力をONにする
・ Wash (必ず毎回行う) （sample injection tube = SIT の洗浄）
PRIME → Stand by (3回)
↓ Macの設定
・ Cell Quest holder
・ Acquire → connect to cytometor → “Acquisition control” （実際の操作ができる）
・ Cytometor → 1～4まで全部だす
・ Acquire → Parametor destination → Panelを選ぶ（チェックする）→usersホルダーに保存（File name設定）
・ Acquire → Acquisition ＆ Storage
・ 右枠からDot plot設定
・ 上のplotsからHistgram plotをだす
・ Detection / Amps
・ Acquire → Counter
↓ Set up
（ネガコンなどで本番の解析前にパラメーターの設定をする→解析後に変更はできない）
・ 水につけた状態でRun（吸えないときはSampleをアームからはずして洗う、またはRestart）
・ Dot-plot
・ 設定が決まったらAcquisition control → Abort → set upの×を消す
↓ Sampleの測定
・ Acquireで吸い始めるが最初はたくさん吸ってしまうので5秒待ってからすわせる
(sampleを吸わないときはSample tubeをcheckしたり、タッピングなどを行う)
・ 測定が終わったらTubeを水にして、Stand by
・ グラフをsaveする
・ windowを閉じる
↓ Dataの解析
・ デスクトップのUsersからsaveしておいたset up 画面をだす、Plotを消す
・ 右枠からHistogram plotをだす
（histogram plot→ analysis→ sampleを選ぶ→ OK → Over rayでグラフを重ねて出すこともできる）
↓ 本体の片付け
・ 5×ハイターtubeにつけてアームをはずしたままRun 1min (SITの外側を洗う)
・ DW tubeにつけてアームをはずしたままRun 1min
・ 5×ハイターtubeをつけてアームをsetしてRun 5min
・ DW tubeをつけてアームをsetしてRun 5min
・ Stand by
・ バルブの圧を抜く
・ 廃液タンクの水を捨てる シース液を黒い線まで入れる （黒いカバーを忘れない）
・ Macをおとす
・ Stand-byから5分以上まってから、本体の電源を切る